GB 6195—86

1 适用范围

　　本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定（不含二价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐），不适用于深色样品。

2 测定原理

　　染料2，6-二氯靛酚的颜色反应表现两种特性，一是取决于其氧化还原状态，氧化态为深蓝色，还原态变为无色；二是受其介质的酸度影响，在碱性溶液中呈深蓝色，在酸性介质中呈浅红色。

　　用蓝色的碱性染料标准溶液，对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定，染料被还原为无色，当到达 滴定终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色，由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。

3 仪器设备

　　a.高速组织捣碎机：8000～12000r/min。

　　b.分析天平。

　　c.滴定管：25ml、10ml。

　　d.容量瓶：100ml。

　　e.锥形瓶：100ml、50ml。

　　f.吸管：10ml、5ml、2ml、1ml。

　　g.烧杯：250ml、50ml。

　　h.漏斗。

4 试剂（凡未加说明者均为分析纯）

　4.1 浸提剂

　4.1.1 偏磷酸：2％溶液（W/V）^*

　*偏磷酸不稳定，切勿加热。

　4.1.2 草酸：2％溶液（W/V）。

　4.2 抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）：称取100mg（准确至0.1mg）抗坏血酸^**，溶于浸提剂中并稀至100ml。现配现用。

　**一般抗坏血酸纯度为99.5％以上，可不标定。如试剂发黄，则弃去不用用。若要检查其纯度，可按附录B方法标定。

　4.3 2，6-二氯靛酚（2，6-二氯靛酚吲哚酚钠盐）溶液：称取碳酸氢钠52mg溶解在200ml热蒸馏水中，然后称取2，6-二氯靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至250ml，过滤至棕色瓶内，保存在冰箱中。每次使用前，用标准抗坏血酸标定其滴定度。即吸取1ml抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中，加入10ml浸提剂，揺匀，用2，6-二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时，另取10ml浸提剂做空白试验。

　　　滴定度按式（1）计算：

     4.4 白陶土（或称高岭土）：对维生素C无吸附性。

5 测定步骤

    5.1 样液制备：称取具有代表性样品的可食部分100g，放入组织捣碎机中，加100ml浸提剂，迅速捣成匀浆。称10～40g浆状样品，用浸提剂将样品移入100ml容量瓶，并稀释至刻度，摇匀过滤。若滤液有色，可按每克样品加0.4g白陶土脱色后再过滤。

    5.2 滴定：吸取10ml滤液放入50ml锥形瓶中，用已标定过的2，6-二氯靛酚溶液滴定，直至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时做空白试验。

6 结果计算

    6.1 计算公式：

　　维生素C按式（2）计算：