B 12286—90

　　本标准等效采用国际标准ISO 5517—1978《水果、蔬菜及制品中铁的测定》。

1 主题内容与适用范围

　　本标准规定了水果、蔬菜及制品中铁含量的测定方法。

　　本方法适用于水果、蔬菜及制品。包括各种酱、泥、果汁、蔬菜汁中的铁含量测定。

2 引用标准

　　GB 12283《水果、蔬菜及制品　有机物的分解方法》中第一篇水果、蔬菜及制品中有机物的分解—灰化法

3 原理

　　有机物分解后，用盐酸羟胺还原三价铁（Fe³⁺）在缓冲介质中稳定二价铁（Fe²⁺），加入显色剂，形成1，10-菲绕啉络合物，在508nm波长处测定红色络合物的吸收值。

4 试剂

　　所有试剂均应使用分析纯，使用蒸馏水。

4.1 硫酸（GB 625），比重1.84g/mL；

4.2 盐酸（GB 622），比重1.18g/mL；

4.3 盐酸羟胺（HG 3—967）溶液，200g/L；

4.4 缓冲溶液

4.4.1 三水合乙酸钠（GB 693）溶液，450g/L；

4.4.2 三水合乙酸钠（GB 693）溶液，272g/L；

4.5 1，10-菲绕啉（HG 3—967）溶液，10g/L

　　取1 g1，10-菲绕啉置100mL容量瓶中，加80mL80℃水和几滴6mol/L盐酸（HCl）溶液，冷却后用水定容。

　　此溶液贮存在阴凉避光处可使用数周。或用相同数量的菲绕啉盐酸溶解在冷水里直接使用。

4.6 标准铁溶液0.02g/L按照下列两种方法之一配制：

　　a. 称取六结晶水的硫酸亚铁铵（GB 661）〔（NH₄）₂Fe（SO₄）₂6H₂O〕7.024g，精确到
0.001g，溶于水中，同时加两滴盐酸（4.2），转移到500mL容量瓶中，用水稀释至刻度并混匀，
用吸管取上述溶液10mL置入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度。

　　b. 称0.200g分析纯铁丝，精确到0.001g，溶解于200mL盐酸中（4.2），加50mL水定量转移至1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度并混合均匀，用吸管转移50mL该溶液置500mL容量瓶中，定容混匀。

4.7 乙酸镁溶液150g/L。

5 仪器设备

　　所有直接与样品接触的仪器设备应避免使用铁制品。

5.1 干燥箱。

5.2 马福炉。

5.3 瓷坩埚，能放置20g左右样品，并在本方法所给条件下不被腐蚀。

5.4 移液管，5、10、20mL。

5.5 容量瓶，50和100mL。

5.6 烧杯，容量50mL。

5.7 分光光度计或光电比色计。

5.8 分析天平，感量0.0001g。

5.9 pH计。

5.10 组织捣碎机。

6 分析步骤

6.1 试样准备

　　固体样品将可食部分仔细混合均匀；

　　液体样品取样时要摇匀；

　　冷藏样品要在密封容器中预先融化，样品融化过程中出现的液体，在混合样品以前，要加到样品中并混匀。

　　粘稠样品（酱）要在捣碎机中搅拌均匀。

　　罐头样品开封后要及时测定。

6.2 分解

　　按GB 12283水果、蔬菜及制品中有机物的分解中的任何一种方法进行有机物分解。如用灰化法进行分解，最后溶解灰分用5mL硫酸而不是1mL硫酸。

6.3 预备试验

　　进行预备试验以确定所要加入的缓冲液体积X。

　　根据预计的铁含量，用移液管取一体积（5、10或20mL）由6.2得到的试液置50mL烧杯中（如溶液体积太少可用水稀释到20mL），加5mL盐酸羟胺溶液（4.3）取一定体积的缓冲液（4.4.1）加入到烧杯中，测定pH值，要求pH值在3.5～4.5之间。

　　加入缓冲液体积为X。

　　取试液体积为V₁mL。

6.4 测定

　　取由6.2得到的测试液V₁mL（见6.3）置50mL容量瓶中，加5mL盐酸羟胺溶液，XmL缓冲液（4.4.1）使溶液pH值在3.5～4.5之间，加2mL1，10-菲绕啉溶液（4.5）用水定容。静置30min以上。

　　用分光光度计或光电比色计在508nm波长处测定吸光度。如果色度太强或太弱，可改变V₁的毫升数或改变试样的称样量。

6.5 空白试验

　　所有试剂用量相同，不加试样，按照试样测定的步骤进行空白试验。

6.6 标准曲线的绘制

　　在7个100mL容量瓶中，分别加入0、5、10、20、30、40、50mL标准铁溶液（4.6），2mL盐酸溶液，定容摇匀。再取7个50mL容量瓶，分别加入上述溶液各20mL，相当于0、20、40、80、120、160、200μg的铁，分别加5mL盐酸羟胺溶液（4.3）和3.5mL缓冲液（4.4.2），摇匀后再加2mL1，10-菲绕啉溶液（4.5）定容混匀后静置30min，再摇匀。

　　用分光光度计或光电比色计在508nm波长处，以空白溶液做参比，测定吸光度。以铁的微克数为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

7 结果表示

7.1 计算公式

7.1.1 液体试样以mg/L表示

        按式（1）计算：