GB 8856—88

　　本标准参照采用国际标准ISO 1871—1975《农产食品—凯氏法测定氮含量的一般性说明》。

1 适用范围

　　本标准适用于水果、蔬菜产品粗蛋白质的测定。

2 引用标准

　　GB 5009.5—85食品中蛋白质的测定方法

3 原理

　　在催化剂存在时用硫酸消化有机物，把有机氮转变为氨态氮。碱化蒸馏，用硼酸溶液吸收氨。用盐酸标准溶液滴定。结果乘以蛋白质换算系数6.25，即为粗蛋白质含量。

4 试剂

　　全部试剂均为分析纯，均用不含氨的蒸馏水配制。

    4.1 硫酸铜。

    4.2 硫酸钾。

    4.3 硫酸。

    4.4 2％硼酸溶液（m/V）。

    4.5 混合指示剂溶液：1份0.1％甲基红乙醇溶液与5份0.1％溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。或2份0.1％甲基红乙醇溶液与1份0.1％次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。

    4.6 40％氢氧化钠溶液（m/V）。

    4.7 0.05N盐酸标准溶液。

5 仪器

　　定氮蒸馏装置：如图所示。

定氮蒸馏装置

1—500mL定氮瓶；2—定氮蒸馏球；3—节流夹；4—漏斗；5—冷凝管；6—接收瓶

6 操作方法

    6.1 样品处理：称取0.5～2g固体样品或2～8g半固体样品，精确至0.001g，或准确吸取5～15mL液体样品（约相当氮20～40mg），移入干燥的500mL定氮瓶中，加入0.5g硫酸铜，5g硫酸钾及20mL硫酸，充分混匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全消失后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈透明蓝绿色后，再继续加热30min。取下放冷，小心加入200mL水，再放冷。加进适量助沸剂（如颗粒状浮石）。

    6.2 在接收瓶内加入25mL2％硼酸溶液及5滴混合指示剂溶液。连接蒸馏装置，冷凝管的出口插入硼酸溶液面下。放松节流夹，通过漏斗倒入70～80mL40％氢氧化钠溶液，并转动定氮瓶，混匀内容物，再倒入100mL水，夹紧节流夹，加热蒸馏，直至氨被完全蒸出，约收集150mL馏出液（在30min内）。将冷凝管移开液面，再蒸馏1min，停止加热。用少量的水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，用0.05N的盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。

　　同时做试剂空白试验。

    6.3 计算

     X=〔（V₁-V₂）×N×0.014/m〕×F×100

    6.4 结果

　　若符合重复性要求，取两次测定的算术平均值作为结果。结果精确至0.01％（m/m）。

    6.5 重复性

　　同一分析者同时或相继两次测定结果的相对误差不应超过5％。